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【摘要】目的：探讨两种高危型HPV检测在宫颈癌早期筛查中的实施效果。方法：选择宫颈癌患者80例作为研究对象，对其实施HC2-HPV-DNA（第二代杂交捕获技术）与PCR（聚合酶链式反应）方法进行高危型HPV检测。观察对比两组检测方法对高危型HPV的诊断结果。结果：本组80例患者均经病理诊断确诊，经PCR检测HPV阳性率为90.00%，明显低于HC2-HPV-DNA检测的100.00%，差异具有统计学意义（P<0.05）；HC2-HPV-DNA检测的敏感度、特异度分别为100.00%、100.00%，均高于PCR检测的90.00%、87.50%（P<0.05）。结论：相较于PCR检测，HC2-HPV-DNA技术更适于宫颈癌早期筛查，诊断准确率更高，适于临床应用。
【关键词】PCR；HC2-HPV-DNA；HPV检测；宫颈癌；早期筛查
【中图分类号】R711.74【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2016）09-0113-02
宫颈癌是妇科临床常见的恶性肿瘤之一。近年来，随着女性生活方式的变化，该病的发生率显著上升，且有向年轻化扩增的趋势，给其健康带来了严重的影响[1]。目前，临床普遍认为人乳头瘤病毒（HPV）感染是宫颈癌主要的致病原因[2]。所以强化HPV检测的符合率，并对感染者尽早采取干预措施是预防宫颈癌的关键。HC2-HPV-DNA（第二代杂交捕获技术）与PCR（聚合酶链式反应）方法是检验HPV的主要方法，其中前者是美国FDA唯一认证的HPV实验室诊断方法，具有生物安全性强及诊断结果准确等特点[3]。本研究通过分析HC2-HPV-DNA与PCR方法在临床中应用效果，旨在探寻宫颈癌早期筛查的可靠方法，并以此完善防治措施。现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料选择2014年5月至2015年5月期间于我院收治的宫颈癌患者80例，年龄25～60岁，平均年龄（44.5±5.3）岁。入组标准：所有患者均经病理检查确诊；有性生活史；患者对本次研究知情，已签署知情同意书。排除标准：子宫切除史；合并宫颈管增生、宫颈糜烂及宫颈充血者；急性生殖道炎症；盆腔放射治疗；3d内冲洗过阴道或给阴道上药或3个月内应用过性激素治疗；妊娠期女性。
1.2方法
1.2.1采集标本采集本组患者的标本，采集前有如下几点注意事项：24h内无性行为；3d内未采取过阴道冲洗或阴道上药操作；取样前未采取过任何妇科疾病治疗；非月经期。采样时将醮有生理盐水的拭子拭净宫颈，去除多余分泌物，通过窥器充分暴露宫颈口，用棉拭子在宫颈管内鳞柱上皮采样，并顺时针旋转两周，以便获取到宫颈脱落细胞。最后将拭子浸入到保存液中，充分漂洗，放置于2～8℃的冰箱内待检。
1.2.2设备与仪器HC2-HPV-DNA设备与试剂盒均由美国Digene公司提供，试剂盒注册号：国食药监械（进）字2009第3402244号；PCR检测试剂盒由深圳港龙生物技术有限公司提供，批准文号：国食药监械（准）字2011第3400935号。
1.2.3检验方法参照《中华妇产科学》[4]中的对HPV阴性、阳性诊断标准，评估两种检测方法的诊断效果。①PCR：根据HPV的L1基因靶序列制定高度特异的探针与引物，测定13种高危型HPV的DNA，具体操作方法严格参照试剂说明书执行。阴性标准：低于500拷贝/ml；阳性标准：500拷贝/ml 或以上。②HC2-HPV-DNA：通过试剂盒测定宫颈口脱落细胞中13种高危型HPV的DNA，具体操作方法严格参照试剂说明书执行。阴性标准：低于1.0pg/ml；阳性标准：1.0pg/ml或以上。
1.3观察指标观察对比两组检测方法对高危型HPV的诊断结果，诊断敏感度与特异度。
1.4统计学处理通过SPSS15.0统计学软件处理，计数资料以（%）表示，采用χ2检验；计量资料以（x±s）表示，采用t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2结果
2.1两组检测方法对高危型HPV的诊断结果对比本组80例患者均经病理诊断确诊，经PCR检测HPV阳性率为90.00%，显著低于HC2-HPV-DNA检测的100.00%，差异具有统计学意义（P<0.05）。见表1。
2.2两种检测方法对高危型HPV的诊断敏感度与特异度对比HC2-HPV-DNA检测的敏感度、特异度分别为100.00%、100.00%，均高于PCR检测的90.00%、87.50%（P<0.05）。见表2。
3讨论
宫颈癌属于女性生殖系统的常见恶性肿瘤，其发病率呈逐年递增的趋势。所以，采取有效的诊疗方法控制宫颈癌的发生、发展，降低其死亡率十分必要。目前，临床认为HPV感染是导致宫颈癌的主要病因，且HPV持续性感染是宫颈癌起病、进展的重要标志物[5]HPV普遍存在于自然界中，且HPV病毒种类约有100余种，但多数病毒均不致病，能够通过自身免疫系统进行清理，仅有部分病毒有致癌性[5]。研究发现，当体内持续存在HPV感染时，它与宫颈癌高危因素，例如：激素、肥胖、吸烟、多胎、早育及沙眼衣原体、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等病原体混合感染及作用下，才能诱发宫颈癌[5]。根据HPV病毒的致病情况可将其分为高危型与低危型两种，其中高危型HPV与宫颈癌的发生、发展具有密切的相关性，而消除高危型HPV可以有效降低宫颈癌的发生风险，对防治宫颈癌具有重要的意义。
异常细胞宫颈涂片筛查是诊断宫颈癌的主要方法，尽管宫颈细胞涂片有效提高了HPV的检测率，但其自身却有一定的局限性，主要表现为：对于腺体病变方面的诊断敏感度较低；重复性差，不同医师观察涂片可发现不同结果；无法预测疾病的潜在风险性，对细胞学正常的受试者无法预测其一年或两年后得病的风险性；假阳性结果较多，而对假阳性受试者的情况进行追踪与检查能够消耗掉许多医疗资源，造成资源浪费。近期研究发现，宫颈涂片即使在最佳条件下，其准确度也仅算作中等，且对宫颈癌前病变与宫颈癌监测的敏感度也相对较低[6]。所以，探寻一种检测准确率更高的方法来完善宫颈癌筛查工作十分必要[7]。
目前，HC2-HPV-DNA与PCR是临床用于测定高危型HPV的主要的方法[8]。其中HC2-HPV-DNA是美国FDA唯一认证的宫颈癌筛查方法，其原理是通过捕获RNA抗体并以化学发光法将信号放大来观察高危型HPV的存在，而PCR则是通过DNA扩增技术来测定高危型HPV[9]。相较于PCR技术，HC2-HPV-DNA的优势主要表现为：①操作方法简便；②无实验交叉作用，降低了结果的假阳性反应，可靠性更强；③无酶抑制反应，降低了结果的假阴性反应；④操作过程中不会造成病毒复制，所以安全性较佳。本研究中，PCR检测HPV阳性率为90.00%，显著低于HC2-HPV-DNA检测的100.00%（P<0.05），这与相关报道结果一致[10-11]。此外，HC2-HPV-DNA检测的敏感度、特异度也均高于PCR检测方法（P<0.05）。从检测原理来看，HC2-HPV-DNA应用了信号放大技术与探针技术，避免了PCR检测过程中DNA错配与交叉反应的假阳性，所以结果可靠性更强。虽然高危型HPV感染是宫颈癌的重要致病原因，但不能说明所有高危型HPV阳性患者均患有宫颈癌。所以，HC2-HPV-DNA技术无法完全取代宫颈活检、TCT及宫颈涂片等检查，但可作为评估宫颈癌风险的重要手段。
综上所述，相较于PCR检测，HC2-HPV-DNA技术更适于宫颈癌早期筛查，诊断准确率更高，适于临床应用。
参考文献
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（收稿日期：2016.03.09）