【摘 要】目的：探讨分析TCT与肿瘤细胞DNA定量分析应用于宫颈癌普查的临床研究。方法：选取宫颈癌筛查的566例患者，所有患者均进行TCT与肿瘤细胞DNA定量分析及组织病理学检查。结果：随着宫颈病变病理级别的升高，宫颈脱落细胞DNA检测倍体异常阳性表达率逐渐增高，且强阳性表达率逐渐增高。TCT异常检出率显著低于DNA检测，两组比较P<0.05，差异具有统计学意义。结论：TCT与肿瘤细胞DNA定量分析在宫颈病变诊断中有很好的价值。两者联合检测可减少漏诊，及早发现宫颈早期病变，对防止宫颈癌有着积极的作用。
【关键词】TCT；肿瘤细胞DNA定量分析；宫颈癌
宫颈癌作为妇产科常见恶性肿瘤疾病，好发于各阶段育龄期妇女，发病率及死亡率仅分别次于乳腺癌和肺癌[1-2]。从宫颈上皮内瘤变（CIN）到宫颈癌的演变一般8～10年左右，及时发现CIN，其治愈率几乎达100%[3]。因此，及时、准确地筛查出CIN，是预防宫颈癌的关键。液基薄层细胞学（TCT）技术比传统宫颈刮片巴氏细胞学检查效果更佳，但易漏诊，因此宫颈癌筛查迫切需要其他指标或手段来协助以上检查。DNA是细胞核内的遗传物质，只有增殖细胞才会有染色体的复制和加倍，但生理状态下人体90%的细胞处于静止期，不复制。研究发现，CIN和宫颈癌可以导致染色体复制，故采用DNA定量分析检测宫颈细胞倍体异常有助于早期发现CIN和宫颈鳞癌。我院2013年4月至2013年12月采用TCT与肿瘤细胞DNA定量分析，用于宫颈癌筛查，收到较好临床效果，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
本研究选取2013年4月至2013年12月在我院进行宫颈癌筛查的566例患者，所选患者年龄最小26岁，最大76岁，所有患者均进行TCT与肿瘤细胞DNA定量分析及组织病理学检查，以组织病理结果为诊断标准，将其分为宫颈炎组、宫颈上皮内瘤变组及宫颈癌组。
1.2 方法
1.2.1 液基细胞学检测（TCT）患者取膀胱截石位，使用阴道窥器扩张阴道，充分暴露子宫颈。擦净宫颈分泌物，取样刷刷取宫颈及阴道脱落细胞，液基制片机（陕西高源妇幼保健服务有限公司MCT-2型薄屋细胞制片分析系统）自动程序化制片，制片完成后95%酒精固定，巴氏染色，高倍光镜下观察，明确细胞学诊断及分级。细胞DNA倍体定量分析技术（麦克奥迪（厦门）医疗诊断系统有限公司），取材与TCT取材相同。取材前3天均要求无阴道冲洗、用药史。
1.2.2 宫颈组织活检患者取膀胱截石位，使用阴道窥器扩张阴道，充分暴露子宫颈。调整阴道镜焦距，物距。以低倍镜观察子宫颈全貌，发现明显病变处，转为高倍镜仔细观察，钳取组织活检；若未发现明显病灶者，使用3%醋酸水溶液和复方碘溶液涂于子宫颈表面，借与鳞状上皮区分，明确病变范围，仍未发现病变者于宫颈处多点活检。组织标本常规5%福尔马林浸泡送检，石蜡包埋切片（4um），HE染色，高倍镜下明确病理学诊断及分级。
1.3 判读标准
TCT采用2001年TBS分级系统进行细胞学诊断：宫颈上皮内病变阴性（NILM），未明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞（ASC-US），低级别宫颈鳞状上皮内病变（LSIL），高级别宫颈鳞状上皮内病变（HSIL），宫颈鳞状细胞癌（SCC）；未明确诊断意义的非典型腺细胞（AGC-US）和腺癌（ACC）。将ASC-US和AGC-US及其以上者为细胞学阳性判为阳性。
DNA定量检测判读：细胞种类分为：正常二倍体细胞，正常增生细胞或疑似病变细胞，病变细胞。以每例患者出现的DNA异常扩增细胞百分比进行分级。增生细胞小于细胞总量的10%为可疑异常与未见DNA倍体异常细胞均判读为阴性（-）表达；增生细胞百分比大于10%且未见DNA倍体异常细胞者为弱阳性（+）表达；可见少量基因异常扩增，细胞数小于等于3个者为中度阳性表达（++）；大于等于3个者为强阳性表达（+++）。
组织病理学检查诊断分为：炎症、CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级（包括原位癌累及腺体）、鳞状上皮细胞癌（SCC）等。
1.4 统计学方法
采用SPSS 17.0软件进行统计分析。计数资料采用χ2检验，以P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
在566例样本中，经组织病理学活检，74例异常，其中宫颈炎42例，CIN I～III级24例，宫颈癌8例。TCT结果显示有75例为异常，其中宫颈炎31例，CIN I～III级9例，宫颈癌3例。宫颈细胞DNA倍体检测可疑异常及异常者78例， TCT异常检出率显著低于DNA检测，两组比较P<0.05，差异具有统计学意义。不同病理类型中宫颈脱落细胞DNA检测表达，宫颈癌组均强阳性表达，表达率100.00%，宫颈炎组以阴性表达为主，表达率95.24%，CIN组以强阳性表达和中度阳性表达为主，组间比较阴性表达、中度阳性表达、强阳性表达有显著的统计学差异（P<0.01）。结果显示，随着宫颈病变病理级别的升高，宫颈脱落细胞DNA检测倍体异常阳性表达率逐渐增高，且强阳性表达率逐渐增高。见表1 。
3 讨论
宫颈癌是目前威胁妇女健康的主要恶性肿瘤之一，近年来我国宫颈癌的发生率有明显上升和年轻化趋势，发病以每年2%～3%的速度增长，对宫颈CIN和早期癌的及时高效筛查和正确处理、是防止宫颈癌的关键。宫颈细胞DNA检测可以早期发现CIN和宫颈癌，作为宫颈病变的筛查是有效、可行的。
本文对566例患者行TCT与肿瘤细胞DNA定量分析结果显示，肿瘤细胞DNA定量分析在宫颈病变的检测中的作用明显优于TCT，两者比较有显著性。DNA检测联合应用TCT在宫颈病变诊断中有很好的价值。两者联合检测可减少漏诊，提高细胞学检查质量，及早发现宫颈早期病变，对防止宫颈癌有着积极的作用。
参考文献
[1]张红薇.宫颈癌及癌前病变经阴道彩色多普勒超声检查分析[J].实用医技杂志，2011，18（8）：814-815.
[2]闫敬泽.年轻妇女宫颈癌31例临床病理分析[J].实用医技杂志，2010，17（4）：377.
[3] 郎景和.子宫颈上皮内瘤变的诊断与治疗[J].中华妇产科杂志，2001，36（5）：261-263.