[摘要] 目的：探讨宫颈液基薄层细胞学（TCT）检测法联合高危型人乳头瘤病毒杂交捕获法Ⅱ（HC2）对宫颈上皮内瘤变的诊断价值。方法：回顾性分析2008年1月~2011年1月1 557例门诊患者的TCT和HC2检测结果，其中632例TCT检查异常者行阴道镜下多点活检。结果：1 557例患者中高危型HPV感染率为36.7%，其中17~30岁年龄组患者的HPV感染率为51.6%，明显高于其他年龄组。TCT检查正常组HPV感染率为26.2%；TCT检查阳性组、LSIL组、HSIL组及SCC组的HPV感染率分别为73.5%、79.7%、86.3%及93.7%，均明显高于TCT正常组。TCT检查阳性者与宫颈活检病理符合率为71.5%；高危型HPV-DNA与TCT检查均为阳性组与病理检查符合率为89.0%。结论：高危型HPV感染与宫颈病变严重程度密切相关，HC2检测联合TCT是筛查宫颈癌前病变的可靠手段。
[关键词] 人乳头瘤病毒；杂交捕获法；液基薄层细胞学检查；阴道镜；宫颈上皮内瘤变
[中图分类号] R737.33 [文献标识码]A[文章编号]1674-4721（2011）06（b）-028-02
The value of high-risk HPV detection by Hybrid Capture Ⅱand TCT in screening cervical intraepithelial neoplasma
WEN Ying
Dalian Obstetrics and Gynecology Hospital & Dalian Maternity and Child Care Hospital, Liaoning Province, Dalian116033, China
[Abstract] Objective: To evaluate the value of high-risk HPV (hrHPV) detection by Hybrid Capture Ⅱ(HC2) and thin-prep cytology test (TCT) in screening cervical intraepithelial neoplasm (CIN). Methods: A retrospective analysis was done on 1 557 patients screening with HC2 and TCT. Among them, 632 patients received colposcopy-directed biopsy with abnormal TCT results. Results: Among the 1 557 patients, the incidence of hrHPV infection was 36.7% and had a higher tendency at 17-30 age. The incidence of hrHPV infection with abnormal TCT results, low squamous intraepithelial lesion, high squamous intraepithelial lesion, and squamous carcinoma were 73.5%, 79.7%, 86.3% and 93.7% respectively, significantly higher than 26.2% which was the incidence of hrHPV infection with normal TCT results. The coincidence on diagnosis of CIN between HC2 combined TCT and pathologic examination of biopsy was 89.0%, significantly higher than 71.5%, the coincidence on diagnosis of CIN between TCT and pathologic examination of biopsy. Conclusion: hrHPV infection has a close relation with CIN, increasing along with the severity of CIN. HC2 combined TCT is a reliable method for screening CIN.
[Key words] Human papilloma virus; Hybrid captureⅡ; Thin-prep cytology test; Colposcopy; Cervical intraepithelial neoplasm
子宫颈癌是威胁妇女健康最为严重的疾病之一，在女性肿瘤发病率中居第二位。我国每年死于子宫颈癌的人数约达5万，新发病例10万左右，约占全世界子宫颈癌新发病例的1/5，宫颈癌的防治工作一直是我国女性卫生保健的重点。由于宫颈癌的发生存在着一个较长的、可逆转的癌前病变期，对宫颈癌前病变——宫颈上皮内瘤变的干预是防治宫颈癌的重要环节。
国内外已公认生殖道人乳头状瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染是导致宫颈癌的主要病因。高危型人乳头状瘤病毒杂交捕获法Ⅱ（Hybrid Capture Ⅱ，HC2）是目前国际唯一获得美国FDA认证的HPV检测方法，得到世界范围的认可。宫颈液基薄层细胞学（thin-prep cytology test，TCT）检测法也是目前临床普遍采用的宫颈癌前病变及宫颈癌的主要筛查手段。
本研究旨在初步探讨TCT联合HPV HC2检测对宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasm，CIN）的诊断价值。
1资料与方法
1.1一般资料
2008年1月~2011年1月在大连市妇产医院暨妇幼保健院门诊进行TCT和HC2二联筛查的患者1 557例，其中TCT检查异常行阴道镜下多点活检的患者632例（42%），年龄为17~69岁，平均（31.30±9.05）岁。高危型HPV-DNA检测方法：采用美国Digene公司提供的试剂盒，通过杂交捕获二代检查检测高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68），当RLU/PC≥1.0时为阳性。
1.2 TCT及诊断标准
采用TCT 专用毛刷取材，采集宫颈鳞柱上皮交界部位及宫颈管内脱落细胞，涮洗在TCT专用取样瓶中，经TCT专用制片机制成薄层涂片，经巴氏染色后镜检。宫颈细胞学诊断采用2001年修订的TBS分类法分为正常范围、意义不明的不典型鳞状上皮（ASCUS）和腺上皮（AGCUS）、鳞状上皮内病变[分为低度鳞状上皮内病变（LSIL）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）、鳞状细胞癌（SCC）]，对于腺上皮病变又分为倾向于高度病变的不典型腺细胞和腺癌。阳性诊断为意义不明的不典型鳞状上皮/腺上皮及以上病变。
1.3 宫颈活组织检查
对于细胞学检测阳性患者，由2名固定医师行阴道镜检查，如有异常，自异常区域多点取材；如无异常，则常规取移行带9点、12点、3点和6点4处。宫颈组织病理学诊断分为：正常或炎症；CIN按轻、中、重分为3级，CINⅠ（相当于宫颈轻度不典型增生）、CINⅡ（相当于宫颈中度不典型增生）、CINⅢ（相当于宫颈重度不典型增生和原位癌）；早期浸润癌（包括微小浸润癌）；浸润癌。
1.4 统计学处理
采用SPSS 13.0统计软件进行χ2分析，P＜0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1高危型HPV感染率与年龄的关系
1 557例患者中高危型HPV阳性的患者572例，占36.7%，HPV感染的平均年龄为（32.2±7.4）岁，其中17~30岁年龄组患者的HPV感染率为51.6%，高于其他年龄组，差异有统计学意义（P＜0.05）。不同年龄组患者高危型HPV感染的情况见表1。
2.2 TCT检查正常与阳性患者的高危型HPV感染情况
1 557例患者中TCT检查正常者1 210例，其中高危型HPV阳性者317例，占26.2%；TCT检查阳性者347例，其中高危型HPV阳性者255例，占73.5%，LSIL组、HSIL组及SCC组的HPV感染率分别为79.7%、86.3%及93.7%，均明显高于TCT正常组（P＜0.05）。
2.3 TCT检查阳性组和HPV-DNA+TCT同时阳性组与病理检查的比较
1 557例患者中TCT检查阳性者347例，其中阴道镜下宫颈活检病理检查阳性者248例，阳性符合率为71.5%；高危型HPV-DNA与TCT检查同时阳性者255例，病理检查阳性者227例，阳性符合率为89.0%。该两组与病理检查结果符合率比较差异有统计学意义（P＜0.05），详见表2。
3讨论
2008年的诺贝尔生理医学奖获得者德国的zur Hausen教授首先揭示了HPV感染和宫颈癌的关系，此后，宫颈癌和女性生殖道HPV感染的相关研究不断深入，现已明确，HPV感染是宫颈癌发生的根本病因[1-2]。妇女生殖道HPV感染常见，70％~80％妇女一生曾被HPV感染过。年轻性活跃的女性HPV感染率最高，感染高峰年龄为18~28岁。在本研究中1 557例门诊筛查患者的高危型HPV感染率为36.7%，其中17~30岁年龄组的感染率为51.6%，显著高于其他年龄组。
Danish的研究表明连续2次HPV阳性，10年内CINⅢ的发生率为20％；如连续2次HPV阴性，10年内CINⅢ的发生率仅为2.3％，5年内CINⅢ的发生率仅为0.5％[3]。在本研究中TCT检查阳性患者较检查正常者，高危型HPV感染率明显增高，随着宫颈病变程度的加重感染率呈上升趋势，因此，HPV感染与宫颈病变的严重程度密切相关，子宫颈癌的筛查中HPV检测是一个非常有意义的指标。
本研究中高危型HPV DNA检测采用的杂交捕获法是一种基于信号放大的酶标板技术，它使用化学发光法来定量检测HPV DNA，操作简易，检测结果客观性较强，敏感性及特异性都较高，被美国FDA批准用于临床检测HPV的感染。国外研究显示，HC2检测的灵敏度和特异度分别可达98%和86%左右[4-5]。但HC2不能对HPV进行具体分型，而且存在交叉杂交的问题，然而不同的HPV型有不同的致病能力，因此在临床上有待发展HPV基因型的分型检测方法。
妇女在感染了HPV后，30％~50％出现宫颈上皮轻度病变，大部分在感染后转为正常，只有高危型HPV持续感染的妇女，才成为子宫颈癌的高发人群。由HPV感染到发展成为子宫颈癌需要9~25年时间，潜伏期长可能与病毒整合到宿主核基因组适当的位置需要很长时间有关，因此单纯的HPV检测使宫颈癌的初筛受到限制。在本研究中，高危型HPV-DNA与TCT检查同时阳性者与病理检查符合率为89.0%，TCT与HPV-DNA HC2互为补充，符合率高，以便对患者发生宫颈高度癌前病变的风险做出恰当评估，从而尽可能避免CIN漏诊。
[参考文献]
[1]zur Hausen H. Human papillomaviruses and their possible role in squamous cell carcinomas[J].Curr Top Microbiol lmmunol,1977,78:1-30．
[2]zur Hausen H．Papillomaviruses and cancer：from basic studies to clinical application[J].Nat Rev Cancer,2002,2(5):342-350．
[3]Kjaer S, Hφgdall E, Frederiksen K, et al.The absolute risk of cervical abnormalities in high-risk human papillomavirus-positive,cytologically normal women over a 10-year period[J].Cancer Res,2006,66(21):10630-10636.
[4]Schiffman M, Herrero R, Hildesheim A, et al. HPV DNA testing in cervical cancer screening: results from women in a high-risk province of Costa Rica[J].JAMA,2000,283(1):87-93.
[5] Ledqer WJ, Jeremias J, Witkin SS.Testing for high-risk human papillomavirus types will become a standard of clinical care[J].Am J Obstet Gynecol,2000,182(4):860-865.
（收稿日期：2011-04-11）
注：“本文中所涉及到的图表、公式、注解等请以PDF格式阅读”