[摘要] 目的：比较简易液基涂片技术与传统涂片技术在痰液细胞学的制片效果及痰癌细胞的诊断阳性率。方法：收集患者清晨咳嗽后的痰液置于封闭塑料瓶中，分为两组，一组做传统涂片，另一组用简易液基涂片方法制片。光镜下观察比较两者的制片质量并评估优劣。结果：110例标本中，临床最后诊断42例（38.18%）为阳性，68例（61.82%）为阴性。简易液基涂片中找到癌细胞34例（30.91%），可疑癌细胞5例（4.54%）中除1例临床诊断为阴性要求随访外都为阳性患者；传统涂片中找到癌细胞20例（18.18%），可疑癌细胞14例（12.73%），其中5例液基涂片诊断同为可疑，另7例临床为阳性患者，另2例临床诊断为阴性需要随访。结论：简易液基涂片技术较传统涂片技术能有效地提高痰液细胞学制片质量及痰癌细胞诊断的阳性率。
[关键词] 液基涂片技术；传统涂片；痰液；肺癌
[中图分类号] R734[文献标识码]Ａ [文章编号]1673-7210（2011）04（a）-048-02
Application of simple liquid based smear in sputum examination
CHEN Rong1, JIANG Chunfan2
1.Department of Pathology, Wuhan Medical Treatment Center, Wuhan 430023, China; 2.Department of Pathology, the Central Hospital of Xiangfan City, Xiangfan 441021, China
[Abstract] Objective: To compare the positive ratio of simple liquid based smear and traditional smear in sputum cytology. Methods: The deeply inside sputum of patients in the morning were collected, and were divided into two groups. One was done by the traditional cytology, the other was done by simple liquid based smear. The results under the microscope and the qualities of both slides were compared to evaluate which was best. Results: 110 cases of samples in the finally clinical diagnosis, 42 cases (38.18%) for positive, 68 cases (61.82%) for negative. Simple liquid base smear found in 34 patients (cancer cells, 30.91%), suspicious cancer cells in 5 patients (4.54%) in all the cases clinical diagnosis for negative requirements follow-up outside all positive for patients; traditional smear found in 20 patients (18.18%) cancer cells, suspicious of 14 cases (12.73%), of which 5 cases were diagnosed with liquid base smear as suspicious, the other 7 cases clinical tested positive for the patient, another 2 cases clinical diagnosis for negative need follow-up. Conclusion: Simple liquid based smear is much better than traditional smear in sputum cytology slide quality and positive ratio of carcinoma cells.
[Key words] Liquid base smear technology; Traditional smear; Sputum; Lung cancer
肺癌在我国的发病率及死亡率一直很高，痰液中查找癌细胞无论是对肺癌的筛查还是诊断都是简易且无创伤的有效手段之一。在宫颈癌前病变方面，液基薄层技术较传统刮片检查能大大提高阳性率，但是对于痰液检查，新柏氏TCT等液基薄层制片因其制作过程繁琐且成本较高，限制了其广泛应用。本实验将110例痰液先传统涂片后再用简易液基涂片，比较其制片效果及诊断结果。
1 材料与方法
1.1 材料
选取我院（武汉市医疗救治中心）2009年6月～2010年5月因肺部阴影待查的住院患者送检痰标本110例，其中，男67例，女43例；年龄26～87岁。
1.2 器械与方法
患者晨起漱口后咳出肺深部痰，将痰液收集到可密封塑料瓶中，先用传统涂片方法仔细挑取可疑痰液制成涂片2张（每张直径约1.8 cm）；剩余标本用简易液基涂片方法立即按1∶3至1∶5的比例注入混有消化酶的固定液，振荡固定120 min，离心5 min（1 000 r/min），弃上清，沉淀加入适量50%乙醇固定液混匀离心弃上清，根据标本情况再如此清洗1～3次。最后加2~5滴固定液混匀沉淀涂薄片2张（每张直径约1.8 cm），剩余标本保存。涂片均用95%酒精固定后HE（或巴氏）染色。光镜下观察诊断。
1.3 统计学方法
采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组涂片质量镜下比较
简易液基涂片中背景干净，无黏液及过多的红细胞和炎细胞，上皮细胞较多，且分散无重叠，阳性涂片中癌细胞分散，形态清楚，容易辨认；而传统涂片中见大量黏液丝，红细胞及炎细胞较多，且与上皮混杂重叠，上皮细胞总量差别很大，阳性涂片中癌细胞较少且重叠、成堆或呈线状分布，需仔细寻找辨认。见图1。
2.2 两组诊断结果比较
110例标本中，临床诊断42例（38.18%）为阳性，68例（61.82%）为阴性。本实验简易液基涂片中可见癌细胞34例（30.91%），可疑癌细胞5例（4.54%），其中除1例临床诊断为阴性需随访观察外均为阳性患者（即癌与可疑癌共38例为阳性，其与临床的符合率达90.48%）；传统涂片中可见癌细胞20例（18.18%），可疑癌细胞14例（12.73%），其中5例液基涂片同为可疑（包括1例临床诊断为阴性患者），其中7例临床为阳性，另外2例临床诊断为阴性需随访观察（即癌与可疑癌共31例为阳性，其与临床的符合率达73.81%）。简易液基涂片的诊断结果与传统涂片的诊断结果比较差异有统计学意义（χ2=8.06，P<0.05）。见表1。
3 讨论
痰液中查找癌细胞无论是对肺癌的筛查还是诊断都是简易且无创伤的有效手段之一。传统涂片是凭经验将痰液中可疑部分挑出后直接涂片于玻片上，再用95%的酒精固定，其制片方法简单易操作，临床普遍使用，但是这种涂片方法存在一些问题：①从痰标本的收集到制作固定之间有一定时间，细胞容易自溶变性。②其往往只能获取局部少量标本（可能只为其阴性成分）涂片，而大部分（可能包含其阳性成分）的标本被丢弃。③此方法容易造成涂片厚薄不匀，背景中黏液、炎细胞、坏死等混杂重叠影响癌细胞的观察诊断（图1a、b）。本试验中传统制片的癌细胞阳性率偏低及可疑癌的例数居多，可能与其涂片的质量有关。
现在有的医院采用如新柏氏TCT等液基薄层制片技术用于宫颈、痰、胸腹水等细胞学检查。这虽然克服了传统涂片的不足，提高了涂片质量，使诊断的阳性率大幅提高，但其制片耗时耗力，且费用较高。本试验采用的简易液基涂片技术，一方面采用液基固定保存标本，使用机械振荡与酶使细胞从黏液中分离出来，并通过清洗离心去除黏液和部分炎细胞、红细胞及坏死等，使有诊断价值的上皮细胞集中并涂片，从而达到较好的涂片效果（图1a、c）。另一方面，同其他液基薄层技术相比，免去部分耗材仪器设备，制片时间有所缩短，且费用大大降低。
从本试验来看，简易液基涂片诊断癌34例较传统涂片的20例有明显差异；传统涂片诊断可疑癌14例远高于简易液基涂片的5例；若汇总癌与可疑癌，简易液基涂片的阳性患者与临床的符合率达90.48%，要高于传统涂片的73.81%。综上所述，与传统涂片技术相比，简易液基涂片技术能提供较高质量的痰细胞涂片，从而使痰液中癌细胞的诊断阳性率得到提高。
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（收稿日期：2011-01-19）